Аппарат кротова для отбора проб воздуха

1.
Общие положения и область применения

Настоящие методические
указания устанавливают методику проведения микробиологического
количественного анализа концентраций промышленных микроорганизмов и
бактериальных препаратов в атмосферном воздухе населенных мест в
диапазоне от 100 до 5000 клеток в 1 м воздуха.Методические указания
разработаны с целью обеспечения микробиологического контроля
концентрации промышленных микроорганизмов и бактериальных
препаратов в атмосферном воздухе населенных мест и оценки
соответствия уровня их содержания гигиеническим нормативам на
основе учета требований ГОСТов
17.2.4.

02-81 “Охрана природы. Атмосфера. Общие требования к
методам определения загрязняющих веществ” и 8.653-96. ГСИ “Методики
выполнения измерений”.Методические указания
предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий
биотехнологических предприятий, микробиологических лабораторий,
научно-исследовательских институтов, работающих в области гигиены
окружающей среды и аккредитованных в установленном порядке на право
проведения микробиологических исследований.

3.
Пределы измерений

Методика обеспечивает
выполнение измерений количества клеток микроорганизма в воздушной
среде в диапазоне концентраций от 10 до 5000 клеток в 1 м воздуха при доверительной вероятности
0,95.

5.
Средства измерений, оборудование, вспомогательные устройства,
материалы

При выполнении измерений
применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства
и материалы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы

Прибор для
бактериологического анализа воздуха, модель 818 (щелевой прибор
Кротова)

ТУ
64-12791-77

Импактор
микробиологический ИМБ-15

Прибор для
бактериологического анализа воздуха “Флора-100”

Термостаты
электрические суховоздушные или водяные

Автоклав
электрический

ГОСТ 9586-75

Бокс,
оборудованный бактерицидными лампами

Холодильник
бытовой

Весы
лабораторные, аналитические типа ВЛА-200

Микроскоп
биологический с иммерсионной системой типа “Биолам” Л-211

Лупа с
увеличением 10 х

ГОСТ 25706-83

Чашки Петри
бактериологические плоскодонные стеклянные, диаметром 100
мм

Пробирки
биологические, вместимостью 20 и 35 мл

ГОСТ 10515-75

Пипетки мерные
на 1, 5 и 10 мл

ГОСТ 10515-75

Колбы
конические, вместимостью 250 и 500 мл

ГОСТ
1770-74

Секундомер

ГОСТ 9586-75

Барометр

ГОСТ
24696-79

Марля
медицинская

ГОСТ 9412-77

Вата
медицинская гигроскопическая

ГОСТ
25556-81

Предлагаем ознакомиться  Как убрать воздух из теплого пола

5.2. Питательные среды

Агар
микробиологический

ГОСТ 17206-96

Селективная
среда (среда для каждого штамма микроорганизмов представлена в
табл.).

7.
Требования к квалификации операторов

При выполнении измерений
концентрации клеток в воздушной среде соблюдают следующие
требования.Правила техники
безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТу 12.1.005-88.Электробезопасность при
работе с электроустановками по ГОСТу
12.1.019-79 и инструкции по эксплуатации прибора.Руководство “Положение об
организации работы по технике безопасности в микробиологической
промышленности” (1980), “Инструкции по устройству, требованиям
безопасности и личной гигиены при работе в микробиологических
лабораториях предприятий микробиологической промышленности”
(1977).

К
выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с
высшим или средним специальным образованием, прошедшие
соответствующую подготовку и имеющие навыки работы в области
микробиологических исследований.

8.
Проведение измерения

8.1. Условия отбора проб воздуха

Для определения
концентрации микроорганизма производят отбор проб воздуха при
помощи аппарата Кротова со скоростью 10 л/мин на поверхность
плотной питательной среды. Время отбора пробы воздуха 20 мин.
Аппарат Кротова перед каждым отбором пробы воздуха тщательно
протирают спиртом. Особенно тщательно обрабатывают поверхность
подвижного диска и внутреннюю стенку прибора;

наружную и внутреннюю
стенку крышки. На подвижной диск устанавливают подготовленную чашку
Петри со средой, одновременно снимая с нее крышку. Прибор
закрывают. Соприкосновение крышки прибора со средой недопустимо.
После отбора пробы воздуха и остановки диска прибор открывают,
быстро снимают чашку Петри и закрывают крышкой от данной чашки.

На
дне чашки Петри стеклографом отмечают точку контроля, время
аспирации и дату отбора пробы. В том случае, если определяется
концентрация микроорганизмов, имеющих обильный воздушный мицелий,
отбор производят в жидкостные поглотители с последующим разведением
и посевом на плотную питательную среду.

Аппарат кротова для отбора проб воздуха

8.2. Выполнение анализа

Предлагаем ознакомиться  Труба для дымохода из железной трубы

https://www.youtube.com/watch?v=ytpressru

Метод предполагает учет
количества типичных по морфологическим признакам колоний, выросших
на 3-4 сутки после посева воздуха. Прямой метод позволяет учитывать
на чашке до 200 колоний.Селективную среду
тщательно перемешивают и разливают по 20 мл в стеклянные чашки
Петри на горизонтальной поверхности.

При необходимости в
селективную среду добавляют компоненты, подавляющие рост
посторонней микрофлоры. Чашки с застывшей средой помещают в
термостат на сутки при температуре 37 °С, после чего проросшие
чашки бракуют, стерильные чашки используют для контроля
воздуха.После отбора проб воздуха
чашки Петри инкубируют в термостате и производят подсчет выросших
типичных колоний. При необходимости культуру подвергают
микроскопированию.

9.
Вычисление результатов измерения

кл/м, где

– концентрация клеток в
воздухе; – количество колоний, выросших на
чашке;

– концентрация консорциума
(КОЕ/м); – концентрация контрольного микроорганизма
(КОЕ/м); – содержание контрольного микроорганизма в
консорциуме (%).Контрольные
микроорганизмы, входящие в состав консорциумов (препаратов,
созданных на основе живых микроорганизмов и включающих в себя два и
более штаммов), представлены в табл. с пометкой КМ, там же
приведены торговые названия препаратов.

Используемые сокращения и условные обозначения

АС – Агаризованная
средаМПА – Мясо-пептонный
агарМСЭА – Агар с экстрактом
мозга и сердцаРНСП – Роды с неясным
систематическим положениемСАС – Синтетическая
агаризованная средаВЗ – Выброс запрещен

Пояснение к таблице

Микроорганизмы, сведения
о которых представлены в табл., разделены на группы, не являющиеся
формальными таксономическими категориями, но подразделяющие штаммы
на легко определяемые фенотипические единицы.Таксономическое положение
каждого штамма определено до уровня семейства за исключением т.н.
“Родов с неясным систематическим положением” согласно “Определителю
бактерий Берджи” (М.

, “Мир”, 1997).Для каждого из штаммов
микроорганизмов представлена селективная твердая питательная среда
и специальные добавки в среду, необходимые для подавления
посторонней микрофлоры.Колонка “Примечания”
содержит сведения об особенностях штамма как упрощающих его
идентификацию (способность к образованию какого-либо пигмента,
специфическая ферментативная активность и т.д.), так и создающих
возможность экспресс-диагностики.

Предлагаем ознакомиться  Кирпичный дымоход в деревянном доме – Установка дымохода в деревянном доме своими руками

https://www.youtube.com/watch?v=ytadvertiseru

Таблица

N п/п

ПДК aтм., кл/м

Таксономическое положение

Питательная среда (базовая)

Добавки в питательную среду для подавления посторонней
микрофлоры

Условия
культиви- рования (время инкубации
и t °C)

Морфологические признаки колоний

Примечания

1

2

3

4

5

6

7

8

Грамотрицательные аэробные/микроаэрофильные палочки и кокки

1

50

Семейство:
Neisseriaceae. Род: Аcinetobacter Вид: oleovorum
s/paraffinicum
шт. ВСБ 712

МПА

Спирт этиловый
рект. 2 мл/100 мл среды

1 сутки
38 °C

Супер отопление
Adblock detector